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PCR實驗室建設(shè):樣品交付方便快捷:樣本處理間與室外設(shè)置傳遞窗,送樣人員可通過傳遞窗直接從室外將樣品傳遞進實驗室內(nèi),更加安全、快捷。檢測通量大:雙艙式檢測通量約為1000份/天,三艙式約為1500份/天。無須報建:PCR實驗室為集成化成套設(shè)備,無須進行建筑報建等手續(xù),即裝即用。方艙核酸實驗室能快速生產(chǎn)、運輸、就位。
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PCR實驗室為什么要進行三區(qū)隔離?
PCR實驗總是出現(xiàn)假陽性,明明沒有加模板,結(jié)果卻擴出了產(chǎn)物。如果這種現(xiàn)象頻頻出現(xiàn),就要注意一下操作環(huán)境。這里涉及氣溶膠的概念,氣溶膠是由固體或液體小質(zhì)點分散并懸浮在氣體介質(zhì)中形成的膠體分散體系,能在空氣中滯留至少幾個小時。
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PCR實驗室為什么要進行三區(qū)隔離?
PCR反應(yīng)過程中不斷進行升溫降溫,液體蒸發(fā)又冷凝,PCR管中部分空氣形成氣溶膠,攜帶大量的DNA擴增產(chǎn)物(注意,1ng擴增產(chǎn)物中可作為模板的DNA片段數(shù)量,超過1ng起始模板中可擴增DNA片段數(shù)量的幾百萬倍甚至更高。比如人的基因組DNA有30億個bp,要擴增的單拷貝基因片段是300bp,1ng起始模板中可以作為模板DNA片段只占總起始模板DNA總量的千萬分之一)。如果在實驗室打開含PCR擴增產(chǎn)物的管蓋,大量攜帶DNA擴增產(chǎn)物的氣溶膠就會涌出,擴散到空氣中,從而對環(huán)境造成污染。
雖然在整個空間環(huán)境中DNA的含量很低,但由于理論上只要有1個可做為模板的DNA片段也能PCR擴增成功,這就是為什么在污染環(huán)境中陰性對照也能擴增出條帶的原因。所以在PCR實驗室(比如臨床PCR檢驗實驗室),通常有四區(qū)隔離(或至少是三區(qū)隔離)的要求。
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PCR實驗室控制防止污染環(huán)境的方法:
一、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定區(qū)域空氣壓力。選擇全送全排的空調(diào)機機組,設(shè)置有效的中央空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng),根據(jù)不同工作區(qū)域?qū)諝鈮毫Φ囊?正壓或負壓環(huán)境),嚴(yán)格保證規(guī)定的空氣壓力。
二、嚴(yán)格劃分工作區(qū)域。實驗區(qū)應(yīng)科學(xué)劃分,每一實驗區(qū)應(yīng)有明顯的標(biāo)志(例如醒目的標(biāo)牌或不同的地面色調(diào)),以防止機器設(shè)備、實驗試劑在不同實驗區(qū)產(chǎn)生混淆。
三、健全完善實驗室服務(wù)設(shè)施。為保證實驗的順利進行,實驗室設(shè)施應(yīng)盡可能完善,并根據(jù)實驗的具體內(nèi)容配置不同的儀器設(shè)備,如凈化臺、離心機、加樣器等。
本期內(nèi)容就跟大家分享到這里了,更多關(guān)于PCR實驗室設(shè)計的精彩資訊請繼續(xù)關(guān)注我們吧!